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CHO细胞表达蛋白
蛋白表达与收取瞬时表达检测时间点:转染后48小时收取细胞或上清。检测方法:通过SDS-PAGE/Western blot或ELISA进行初步表达分析。蛋白收取胞内蛋白:弃培养液,PBS清洗细胞两次。加入150 μL RIPA裂解液(含5 μL蛋白酶抑制剂、5 μL EDTA),冰上裂解30分钟。
综上所述,提升CHO细胞瞬转蛋白表达需要从转染方式、转染条件、培养条件、试剂盒选择以及其他优化策略等多个方面进行综合考虑和优化。通过合理的优化策略,可以显著提高CHO细胞瞬转蛋白表达量,满足实验和生产的需求。
不同的PEI/DNA比例对CHO细胞和293细胞瞬转蛋白表达量均产生影响。降温策略优化 通过降低培养温度,能够减缓细胞增殖,延长细胞生产蛋白的时间,最终增加蛋白产量。有研究表明,在特定CHO细胞系中使用PEI转染时,降温至一定温度(如32℃或31℃),抗体产量显著提高。
其中,CHO细胞因其良好的基因组背景特征、较快的生长速度和较高的蛋白质表达产量,被用作生物制品行业的主要生产用细胞系。CHO细胞概述 历史与来源 CHO细胞即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary Cell),是最具代表性的动物细胞表达系统,被广泛应用于生物制药领域。
CHO(中国仓鼠卵巢)细胞在生物技术实验中常用于克隆表达蛋白。利用Bionet F1-5MC台式生物反应器进行CHO细胞的批次培养,可以优化生产生物制品的过程。以下是在Bionet生物反应器中进行CHO细胞批次培养的详细操作指南。
CHO细胞的特性主要有以下几点:高效表达外源基因的能力:CHO细胞能高效转录和翻译导入的重组基因,生成大量具有生物学活性的蛋白质或多肽,使其在生物制药领域具有广泛应用前景。